C18 反相色譜柱是高效液相色譜（HPLC）中最常用的一種色譜柱，它的分離原理基于反相分配色譜的原理。
在反相分配色譜中，固定相是一種非極性的吸附劑，如 C18 硅膠，而流動(dòng)相則是極性的溶劑，如甲醇、乙腈等。樣品中的各個(gè)組分在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數(shù)不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。
當(dāng)樣品流經(jīng) C18 反相色譜柱時(shí)，樣品中的各個(gè)組分會(huì)與固定相上的 C18 硅膠相互作用，由于 C18 硅膠是非極性的，樣品中的極性組分會(huì)更容易被固定相吸附，而非極性組分則會(huì)更容易被流動(dòng)相帶走。因此，極性組分在 C18 反相色譜柱中的保留時(shí)間會(huì)更長(zhǎng)，而非極性組分則會(huì)更快地流出。
此外，C18 反相色譜柱還可以通過(guò)改變流動(dòng)相的組成和 pH 值等參數(shù)，調(diào)節(jié)樣品中各個(gè)組分與固定相之間的相互作用，從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。例如，在酸性流動(dòng)相中，弱堿性化合物的保留時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)，從而提高它們的分離效率。
總之，C18 反相色譜柱的分離原理是基于反相分配色譜的原理，通過(guò)樣品中各個(gè)組分與固定相上的 C18 硅膠相互作用，實(shí)現(xiàn)不同組分的分離。通過(guò)改變流動(dòng)相的組成和 pH 值等參數(shù)，可以調(diào)節(jié)樣品中各個(gè)組分的保留時(shí)間和分離效率，從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。
發(fā)布于: 2023-08-28